Neb m02022s T4 DNA ligase 20000u

Características

■ conexión eficiente de terminales pegajosas y terminales planas
■ clonación T / a
■ reparación de corte de ADN dsdna
■ construcción de una biblioteca clonal de alta abundancia
■ conexión entre ARN y ADN

Neb m02022s T4 DNA ligase 20000u

Resumen

La enzima cataliza la formación de enlaces de fosfodiéster con terminales adyacentes de 5 '- ácido fosfórico y 3' - hidroxi en ADN de doble cadena o arn. La enzima no solo puede catalizar la conexión entre extremos homogéneos o pegajosos, sino que también puede reparar el corte de una sola cadena en ADN de doble cadena, ARN o ADN / ARN híbrido de doble cadena.

origen

Purificado deE. coliC600 pcl857 pPLc28 lig8.

Condiciones de reacción

Tampón de reacción de ligasa de ADN 1x T4
[50 mm tris - HCl (ph 7,5 @ 25 ° c), 10 mm mgcl2, 10 mm dtt, 1 mm atp]. * La concentración final del ADN de 5 'es de 0,1 - 1,0 μm, incubada a 16 ° c.
Inactivación térmica: 65 ° C durante 10 minutos.

Definición de la unidad (unidad activa final pegajosa)

La Unidad 1 se refiere a la cantidad de enzima necesaria para conectar el 50% de los fragmentos de ADN Lambda digeridos por Hind III en 30 minutos en un tampón de reacción de ligasa de ADN 2x T4 de 20 μl a 16 ° c [concentración en el extremo 5 'es de 0,12 μm (300 μg / ml)].

Concentración

400.000 unidades / ML y 2.000.000 unidades / ML.

Precauciones

ConE. coliLas Ligasas de ADN requieren nad +, que es diferente de los cofactores, y los cofactores de las Ligasas de ADN T4 son atp.

La enzima de enlace de ADN T4 diluida debe conservarse en un amortiguador de almacenamiento de glicerina al - 20 ° C y al 50% (amortiguador de dilución a, Neb ¿ b8001). Si se utiliza inmediatamente después de la dilución, también se puede diluir con un amortiguador de reacción de ligasa de ADN 1x t4.

La reacción de conexión puede ser en los cuatro amortiguadores enzimáticos de restricción proporcionados por Neb o en

Se realiza en el tampón de reacción de la quinasa de nucleótido múltiple de ADN t4.

Enzima de enlace de ADN T4

Número de artículo

Especificaciones

Precio

Inventario de Beijing

Inventario de Shanghai

#M0202L

100.000 unidades

tener

tener

#M0202M

(alta concentración 5x) 100.000 unidades

tener

tener

#M0202S

20.000 unidades

tener

tener

#M0202T

(alta concentración de 5x) 20000 unidades

tener

tener

#M0202V

10.000 unidades

tener

tener