Folic Acid * columna de inmunoafinidad IAC - Sep en alimentos

Folic Acid * columna de inmunoafinidad IAC - Sep en alimentos

IAC-SEP®* columna de afinidad inmune

(número de producto: iac322)

Usar objetos

IAC-SEP®* columna de afinidadEn muestras purificadas capaces de ser específicas*，Utiliza gel de agarosa en forma de columna como portador sólido, el gel de agarosa se acopla a los anticuerpos * para formar un inmunoadsorbente, y la columna se carga en una columna de inmunoafinidad. Es capaz de purificar específicamente las muestras de *. * Las columnas de afinidad se utilizan ampliamente en la extracción de muestras como bebidas, leche y cereales. este método es rápido, fácil de operar y preciso, y desempeña un papel muy importante en la mejora de la calidad y seguridad de los alimentos.

principio

*La columna de inmunoafinidad puede ser específica para purificar las muestras.*，Las muestras se mezclan con el extracto, se extraen, filtran y luego el filtrado pasa por la columna de inmunoafinidad. En este momento, *MaterialSe une a los anticuerpos en la columna de afinidad. Eliminar las impurezas de la columna de inmunoafinidad con agua destilada. A través de la columna de separación, con un eluyente, se separa * de los anticuerpos. Después de eso, el eluido se inyecta en el líquido de elución en el líquido de alto rendimiento o en el líquido de elución LC - ms para su determinación.

Condiciones de almacenamiento

La columna de afinidad se conserva a 2 - 8 ° c, no se puede congelar y la vida útil es de 18 meses. Se recomienda usar a temperatura ambiente (18 - 30 ° c).

Preparación de soluciones experimentales

pH 7,4 PBSSolución:8.0 Gramos de NaCl + 2,90 gramos de na2hpo4 12h2o + 0,24 gramos de kh2po4 + 0,2 gramos de kcl más 990ml de agua pura para disolver, añadir agua pura a 1 litro.

10%Ascorbato de sodio:Pesar 10 g de l - ascorbato de sodio en un Matraz aforado de 100 ml, añadir agua para disolver y mezclar bien.

Eluido (30% de nitrilo + 0,2% 3ácido fluoroacético): medir con precisión 30 ml de nitrilo y agregarlo al Matraz aforado de 100 ml, y luego agregar 0,2 ml de tresácido fluoroacéticoDespués, establezca la capacidad en 100 ml con agua pura.

Otros reactivos necesarios:(Sigma P1750)

Condiciones de la Cromatografía líquida

Columna: Agilent - c18,4,6 × 150 mm (5um)

Fase móvil:0,1% 3ácido fluoroacético: nitrilo = 85: 15 (v / v)

Caudal: 0,5 ml / min

Detector: detector ultravioleta, 280 nm

Volumen de inyección: 50 ul

Pasos de análisis

1)Extracción y dilución de muestras:

Pasos de operación de fórmulas para bebés, alimentos listos para comer para bebés, leche, leche en polvo, cereales, barras energéticas y otras muestras:Pesaje1 - 10gLa muestra (determina cuánto se pesa en función del rango de detección necesario), se coloca250 mlEn una botella cónica.50ml pH 7,4 PBSSoluciónUnirse aBotella cónicaMezclar bien. unirse4g* sacudida de la mecedora durante 10 minutos.unirse6 ml 10%Ascorbato de sodio, sacudido por una mecedora durante 5 minutos.Coloque el frasco cónico en un sacudidor de baño de agua a 37 ° C durante 2 horas. a continuación, coloque el frasco cónico en un baño de agua a 100 ° C y deje reposar durante 20 minutos. Retire el frasco cónico y enfríe a temperatura ambiente; ConpH 7,4 PBSSoluciónVolumen fijo a100 mlAgitar bien. Extraer el líquido4000 RPMCentrifugación durante 10 minutos. Retire y absorba con precisión 10 ml de líquido superior,de repuesto.

2(...)Purificación de muestras

* El volumen de la columna de inmunoafinidad (adsorción *) es450ngCuando la muestra * exceda el rango de determinación, reduzca adecuadamente el volumen de la columna superior para que esté dentro del rango de detección y calcule el contenido exacto.

Folic Acid * columna de inmunoafinidad IAC - Sep en alimentos